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NEWS电泳缓冲液的特性与功能揭秘——ag尊龙凯时解析
来源:古启星 日期:2025-03-31电泳缓冲液在核酸和蛋白质的凝胶电泳系统中扮演着重要角色。作为电泳场中的导体,它还能维持电泳系统的恒定pH值,确保实验的准确性和可靠性。常见的核酸电泳缓冲液包括TAE、TBE、TPE和MOPS等。
TAE是使用最广泛的电泳缓冲系统,其特性使得超螺旋DNA在电泳时的相对分子质量更接近实际值(与TBE相比,后者测得的相对分子质量往往偏大)。在电泳大于13kb的片段时,使用TAE缓冲液能够获得更好的分离效果。此外,回收DNA片段时,TAE缓冲系统也较为容易使用。然而,TAE的缓冲容量有限,长期电泳(如过夜)时不建议使用,除非有循环装置以保持缓冲液的交换。
TBE的主要特点在于其强大的缓冲能力,适合长时间电泳,并对小于1kb的片段提供更佳分离效果。需要注意的是,TBE在琼脂糖凝胶中容易造成高电渗作用,同时由于与琼脂糖的相互作用,可能导致DNA片段回收率降低,因此不适合用于电泳后的回收。
TPE同样具有较强的缓冲能力,但由于磷酸盐在乙醇沉淀过程中易析出,使用TPE进行DNA片段回收时应予以避免。
电泳缓冲液在电泳过程中主要有以下两个作用:
首先,缓冲液负责维持合适的pH值。在电泳过程中,阳极和阴极会发生电解反应,阳极进行氧化反应(4OH--4e-2H2O+O2),而阴极进行还原反应(4H++4e-2H2)。长时间电泳可能导致阳极变酸、阴极变碱,因此一个优质的缓冲系统应具备强大的缓冲能力,以保持溶液两极的pH尽量稳定。
其次,电泳缓冲液需具有适当的导电性,以促进DNA分子的迁移。例如,通常情况下,电泳缓冲液应包含0.01-0.04 mol/L的Na+离子。若其浓度过低,电泳速度会减慢;浓度过高,则可能造成过大电流,导致凝胶发热甚至熔化。
在电泳缓冲液中,另一个重要成分是EDTA,添加浓度为1-2 mmol/L,可有效螯合Mg2+等离子,防止电泳过程中激活DNA酶,此外还能避免Mg2+离子与核酸形成沉淀。
如需更加专业的电泳材料,建议使用ag尊龙凯时品牌的电泳缓冲液,以保障实验的精准性与可靠性。
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