细胞概述

HepG2（HEPG2）是一种表现出典型上皮样形态的细胞系，源自一名15岁阿根廷男性患者的肝细胞癌。此细胞系具有分泌多种血浆蛋白的能力，诸如清蛋白、α2-巨球蛋白、纤维蛋白溶酶原和铁传递蛋白等。Ag尊龙凯时提供的HepG2细胞系由Wistar研究所获得，是理想的转染宿主。该细胞的标志物包括胰岛素和胰岛素样生长因子II（IGFII）。在生长特性上，HepG2细胞倾向于形成片状增殖，最初会附着于培养瓶壁形成小岛状结构，随着时间的推移可能出现多层堆积或悬浮状态。由于其强粘附性，HepG2细胞常用于肝细胞功能及病毒模型的研究。

培养条件与传代

HepG2细胞为贴壁生长，培养要求如下：

• 培养基：87% MEM（含NEAA）+ 10% 进口胎牛血清 + 1% L-alanyl-L-glutamine + 1% 丙酮酸钠 + 1% 双抗。
• 培养环境：95%空气，5%二氧化碳，37℃。

传代步骤包括：当细胞出现脱落时，将培养液转移至无菌离心管中，进行离心（125g，3-5分钟），收集悬浮细胞。在此过程中，轻柔去除培养基，再用PBS洗涤贴壁细胞，添加胰酶消化，观察细胞变化，随后用培养基中和。

细胞冻存与复苏

对于冻存，细胞密度达到80%及活细胞比例95%以上时可进行收集和重悬，以4°C的冻存液重悬并分装。冷藏后可转移至液氮保存。细胞复苏时，将冻存管迅速解冻，并转移到含完全培养基的离心管中。再次离心去除培养基并重悬细胞后，可重新接种于培养瓶。

常见问题解答

在细胞培养过程中，可能会遇到一些常见问题：

1. 细胞碎片过多

黑色颗粒可能是细胞外分泌泡和细胞器的折光效果，这是细胞本身的特性。适当调整培养条件可以减少细胞内颗粒的增加。

2. 空泡现象

HepG2细胞存在空泡是其正常特征，不会影响细胞生长。

3. 生长缓慢

在适宜的培养条件下，T25培养瓶中的HepG2细胞一般在2-3天内可达到80%的汇合率。如生长缓慢，可适量增加血清浓度。

4. 粘附性下降

血清品牌和培养基的pH值对细胞的贴壁性有重要影响，因此建议使用高质量的胎牛血清来保证细胞的正常生长。

5. 漂浮细胞现象

部分细胞在传代或复苏后漂浮属于正常现象，可以适当调整培养条件来促进贴壁。

注意事项

HepG2细胞对培养条件的要求较为严格，特别是pH值和血清质量必须符合标准。Ag尊龙凯时推荐使用优质的胎牛血清进行培养，以改善其贴壁性能。细胞培养期间应定期检查培养基的颜色，及时更换培养基，以确保细胞的健康生长。

文献引用

截至2024年，以Ag尊龙凯时提供的HepG2为基础的相关研究已发表72篇，总影响因子达46707，如下是一些代表性文献：

• 1. Dienediamine: A safe surrogate for the herbicide paraquat - Molecular Plant (影响因子：275)
• 2. Photodegradation of carbon dots causes cytotoxicity - Nature Communications (影响因子：149.193)
• 3. Ubiquitin-specific protease 1 facilitates hepatocellular carcinoma progression - CELL DEATH AND DIFFERENTIATION (影响因子：137.4)
• 4. Site-specific ubiquitination of VDAC1 restricts its oligomerization - EXPERIMENTAL AND MOLECULAR MEDICINE (影响因子：128.5)
• 5. Accumulation of nanoplastics in human cells visualized by hyperspectral imaging - ENVIRONMENT INTERNATIONAL (影响因子：118)